දිගු පෙප්ටයිඩ සංස්ලේෂණයේ ගැටළු සහ විසඳුම්

ජීව විද්යාත්මක පර්යේෂණවලදී, දිගු අනුපිළිවෙලක් සහිත පොලිපෙප්ටයිඩ සාමාන්යයෙන් භාවිතා වේ.අනුපිළිවෙලෙහි ඇමයිනෝ අම්ල 60 කට වඩා වැඩි පෙප්ටයිඩ සඳහා, ජාන ප්රකාශනය සහ SDS-PAGE සාමාන්යයෙන් ඒවා ලබා ගැනීමට භාවිතා කරයි.කෙසේ වෙතත්, මෙම ක්රමය දිගු කාලයක් ගත වන අතර අවසාන නිෂ්පාදන වෙන් කිරීමේ බලපෑම හොඳ නැත.

දිගු පෙප්ටයිඩ සංස්ලේෂණය සඳහා අභියෝග සහ විසඳුම්

දිගු පෙප්ටයිඩ සංශ්ලේෂණය කිරීමේදී, අපි සෑම විටම ගැටලුවකට මුහුණ දී සිටිමු, එනම්, සංශ්ලේෂණයේ අනුක්‍රමය වැඩි වීමත් සමඟ ඝනීභවනය වන ප්‍රතික්‍රියාවේ ස්ටීරික් බාධාව වැඩි වන අතර ප්‍රතික්‍රියාව සම්පූර්ණ කිරීමට ප්‍රතික්‍රියා කාලය සකස් කළ යුතුය.කෙසේ වෙතත්, ප්‍රතික්‍රියා කාලය දිගු වන තරමට අතුරු ආබාධ වැඩි වන අතර ඉලක්කගත පෙප්ටයිඩයේ කොටසක් සෑදී ඇත.එවැනි අපද්‍රව්‍ය - ඌන පෙප්ටයිඩ දාම දිගු පෙප්ටයිඩ සංස්ලේෂණයේදී නිපදවන ප්‍රධාන අපද්‍රව්‍ය වේ.එබැවින්, දිගු පෙප්ටයිඩයේ සංශ්ලේෂණයේදී, අප විසින් ජයගත යුතු ප්‍රධාන ගැටළුව වන්නේ, ඇමයිනෝ අම්ල ඝනීභවන ප්‍රතික්‍රියාව වඩාත් විස්තීර්ණ හා පූර්ණ බවට පත් කිරීම සඳහා, උසස් තත්ත්වයේ ප්‍රතික්‍රියා තත්ත්වයන් සහ ප්‍රතික්‍රියා ක්‍රම ගවේෂණය කිරීමයි.ඊට අමතරව, ප්‍රතික්‍රියා කාලය අඩු කරන්න, මන්ද ප්‍රතික්‍රියා කාලය දිගු වන තරමට, පාලනය කළ නොහැකි අතුරු ප්‍රතික්‍රියා, අතුරු නිෂ්පාදන වඩාත් සංකීර්ණ වේ.එබැවින් පහත කරුණු තුන සාරාංශ කර ඇත:

මයික්රෝවේව් සංශ්ලේෂණය භාවිතා කළ හැක: ඒකාබද්ධ කිරීමට පහසු නොවන සංශ්ලේෂණ ක්‍රියාවලියේදී හමු වන සමහර ඇමයිනෝ අම්ල සඳහා, මයික්‍රෝවේව් සංස්ලේෂණය භාවිතා කළ හැකිය.මෙම ක්රමය කැපී පෙනෙන ප්රතිඵල ඇති අතර, ප්රතික්රියා කාලය බෙහෙවින් අඩු කරයි, සහ ප්රධාන අතුරු නිෂ්පාදන දෙකක් සෑදීම අඩු කරයි.

Fragment synthesis ක්‍රමය භාවිතා කළ හැක: සමහර පෙප්ටයිඩ පොදු සංස්ලේෂණ ක්‍රම මගින් සංස්ලේෂණය කිරීමට අපහසු වූ විට සහ පිරිසිදු කිරීමට පහසු නොවන විට, අපට පෙප්ටයිඩයේ යම් කොටසක ඇති ඇමයිනෝ අම්ල කිහිපයක සම්පූර්ණ ඝනීභවනය සමස්තයක් ලෙස පෙප්ටයිඩ දාමයට අනුගත කළ හැක.මෙම ක්‍රමය මඟින් සංශ්ලේෂණයේදී බොහෝ ගැටලු විසඳා ගත හැකිය.

Acylhydrazide සංස්ලේෂණය භාවිතා කළ හැක: පෙප්ටයිඩවල ඇසිල්හයිඩ්‍රසයිඩ් සංස්ලේෂණය යනු පෙප්ටයිඩ බන්ධන ක්‍රමය සාක්ෂාත් කර ගැනීම සඳහා ඇමයිඩ් බන්ධන සෑදීම අතර N-පර්යන්ත Cys පෙප්ටයිඩ සහ C-පර්යන්ත පොලිපෙප්ටයිඩ හයිඩ්‍රසයිඩ් රසායනික වරණීය ප්‍රතික්‍රියාවේ ඝන-අදියර සංස්ලේෂණය කිරීමේ ක්‍රමයකි.පෙප්ටයිඩ දාමයේ Cys පිහිටීම මත පදනම්ව, මෙම ක්‍රමය මඟින් සම්පූර්ණ පෙප්ටයිඩ දාමය බහු අනුපිළිවෙලකට බෙදා ඒවා පිළිවෙලින් සංස්ලේෂණය කරයි.අවසාන වශයෙන්, ඉලක්කගත පෙප්ටයිඩය ද්‍රව-අදියර ඝනීභවන ප්‍රතික්‍රියාව හරහා ලබා ගනී.මෙම ක්රමය දිගු පෙප්ටයිඩයේ සංශ්ලේෂණ කාලය විශාල වශයෙන් අඩු කරනවා පමණක් නොව, අවසාන නිෂ්පාදනයේ සංශුද්ධතාවය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි කරයි.

දිගු පෙප්ටයිඩ පිරිසිදු කිරීම

දිගු පෙප්ටයිඩවල විශේෂත්වය අනිවාර්යයෙන්ම බොරතෙල් පෙප්ටයිඩවල සංකීර්ණ සංරචක වලට මග පාදයි.එබැවින්, HPLC මගින් දිගු පෙප්ටයිඩ පිරිසිදු කිරීම ද අභියෝගයකි.පොලිපෙප්ටයිඩ පිරිසිදු කිරීමේ ක්‍රියාවලියේ ඇමයිලොයිඩ් ශ්‍රේණිය, බොහෝ අත්දැකීම් අවශෝෂණය කර දිගු පෙප්ටයිඩ පිරිසිදු කිරීමේදී සාර්ථකව භාවිතා කරයි.නව උපකරණ භාවිතා කිරීම, බහු පිරිසිදු කිරීමේ පද්ධති මිශ්‍ර කිරීම, නැවත නැවත වෙන් කිරීම සහ වෙනත් අත්දැකීම් ක්‍රම මගින් දිගු පෙප්ටයිඩ පිරිසිදු කිරීමේ සාර්ථකත්ව අනුපාතය විශාල ලෙස වැඩිදියුණු විය.