ප්‍රතිදීප්ත අනුනාද ශක්ති හුවමාරුව (FRET)
ප්‍රතිදීප්ත අනුනාද ශක්ති හුවමාරුව (FRET) යනු අන්තර් අණුක විද්‍යුත් ජෝඩුවල අන්තර්ක්‍රියා හරහා පරිත්‍යාගශීලි උද්වේගකර රාජ්‍ය ශක්තිය ප්‍රතිග්‍රාහක උද්වේගකර තත්ත්වයට මාරු කරන විකිරණ නොවන බලශක්ති හුවමාරු ක්‍රියාවලියකි.මෙම ක්‍රියාවලියට ෆෝටෝන ඇතුළත් නොවන අතර එබැවින් විකිරණශීලී නොවේ.මෙම විශ්ලේෂණය වේගවත්, සංවේදී සහ සරල වීමේ වාසි ඇත.
FRET විශ්ලේෂණයේ භාවිතා කරන ඩයි එක සමාන විය හැක.නමුත් බොහෝ යෙදුම්වල ඇත්ත වශයෙන්ම විවිධ ඩයි වර්ග භාවිතා වේ.කෙටියෙන් කිවහොත්, දීප්ති අනුනාද ශක්තිය මාරු කිරීම යනු පරිත්‍යාගශීලි කණ්ඩායම උද්යෝගිමත් වූ විට පරිත්‍යාග කරන්නා (ඩයි 1) සිට ප්‍රතිග්‍රාහක (ඩයි 2) වෙත ඩයිපෝල් යුගලයක් මාරු කිරීමයි.සාමාන්‍යයෙන්, Donor fluorophore කාණ්ඩයේ විමෝචන වර්ණාවලිය, Acceptor කාණ්ඩයේ අවශෝෂණ වර්ණාවලිය සමඟ අතිච්ඡාදනය වේ."ෆ්ලෝරෝෆෝර දෙක අතර දුර සුදුසු වන විට (10 - 100 A), පරිත්‍යාගශීලියාගෙන් ප්‍රතිග්‍රාහකයාට ෆ්ලෝරෝෆෝර් ශක්තිය මාරු කිරීම නිරීක්ෂණය කළ හැක."බලශක්ති හුවමාරු ක්‍රමය ප්‍රතිග්‍රාහකයේ රසායනික ව්‍යුහය මත රඳා පවතී:
1. අණුක කම්පනය බවට පරිවර්තනය වේ, එනම් බලශක්ති හුවමාරුවේ දීප්තිමත් ආලෝකය අතුරුදහන් වේ.(ප්‍රතිග්‍රාහකය ආලෝකය නිවා දමන්නකි)
2. විමෝචනය ප්‍රතිග්‍රාහකයට වඩා තීව්‍ර වන අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ද්විතියික ප්‍රතිදීප්ත වර්ණාවලියේ රතු මාරුවීමක් සිදුවේ.(ප්‍රතිග්‍රාහක යනු දීප්තිමත් විමෝචක වේ).
පරිත්‍යාගශීලි කණ්ඩායම (EDANS) සහ ප්‍රතිග්‍රාහක ජානය (DABCYL) HIV ප්‍රෝටියේස්හි ස්වභාවික උපස්ථරයට ඒකාකාරව සම්බන්ධ වී ඇති අතර, උපස්ථරය විසන්ධි නොකළ විට, DABCYL හට EDANS නිවා දමා පසුව ෆ්ලෝරීන් හඳුනා ගත නොහැක.HIV-1 ප්‍රෝටීස් විසන්ධි කිරීම මත, EDANS තවදුරටත් DABCYL මගින් නිවා නොදමන අතර EDANS luciferases පසුව අනාවරණය කර ගත හැක.EDANS හි ප්‍රතිදීප්ත තීව්‍රතාවයේ වෙනස්වීම් මගින් ප්‍රෝටීස් නිෂේධකවල ඇති බව නිරීක්ෂණය කළ හැක.
FRET පෙප්ටයිඩ යනු පෙප්ටයිඩේස් නිශ්චිත නොවන බව අධ්‍යයනය කිරීමට පහසු මෙවලම් වේ.එහි ප්රතික්රියා ක්රියාවලිය අඛණ්ඩව නිරීක්ෂණය කළ හැකි බැවින්, එන්සයිම ක්රියාකාරිත්වය හඳුනා ගැනීම සඳහා පහසු ක්රමයක් සපයයි.පරිත්‍යාගශීලියා/ප්‍රතිග්‍රාහකයා විසින් පෙප්ටයිඩ බන්ධන ජල විච්ඡේදනය කිරීමෙන් පසු නිපදවන ශීන් නැනෝමෝලර් සාන්ද්‍රණයේදී එන්සයිම ක්‍රියාකාරීත්වයේ මිනුමක් සපයයි.FRET පෙප්ටයිඩය නොවෙනස්ව පවතින විට, එය අභ්‍යන්තර ෆ්ලෑෂ් එක හදිසියේ අතුරුදහන් වීමක් පෙන්නුම් කරයි, නමුත් පරිත්‍යාගශීලියා / ප්‍රතිග්‍රාහකයාට විරුද්ධ ඕනෑම පෙප්ටයිඩ බන්ධනයක් බිඳී ගිය විට, එය ෆ්ලෑෂ් නිකුත් කරයි, එය අඛණ්ඩව අනාවරණය කර ගත හැකි අතර එන්සයිම ක්රියාකාරිත්වය ප්‍රමාණ කළ හැකිය.
පසු කාලය: අගෝස්තු-14-2023